Oppløsning av underenheter av trombin som enzym Agapurin fra Agkistrodon halys gift og sekvensering av aminosyrerester

[Abstract] Mål Å bestemme de N-terminale 15 aminosyrerestene til to lignende underenheter av Agacutin.De to underenhetene til enzymmolekylet må deles for å oppnå underenhetens enkelt peptidkjede og sekvenseres.Metoder Høyrenset Agacutin ble oppnådd ved biokjemisk metode.Enkeltunderenhetsprøver for identifikasjon og sekvensering ble utarbeidet ved hjelp av SDS-PAGE-elektroforese-separasjon, underenhets-klebende strimmelgjenvinning og PVDF-membranelektrooverføringsteknologi.Sistnevnte bestemte 15 aminosyrerester ved N-terminalen av underenheten ved Edman-nedbrytningsmetoden.Resultater Sekvensen til stor underenhet (16 kDa) var DCSSGWSSYEEHQYY, og sekvensen til liten underenhet (15 kDa) var DSSGWSSYEGHEYYV.Konklusjon Sekvenseringsresultatene viste at Agacutin var et nytt slangegift trombinlignende enzym ved å søke i NCBI-databasen.